标准品是实验室定量分析、方法验证的核心参考物质，其配制和稀释的规范性直接决定检测结果的准确性。本文整理了一套简单易懂、可直接落地的操作注意事项，帮助实验人员规避常见误差，保障实验数据可靠。
 

　　一、配制前的准备注意事项
 

　　标准品的预处理
 

　　平衡至室温：从冷藏 / 冷冻环境取出的标准品，需在室温下放置30~60 分钟，使其与实验室环境温度一致，避免因温度差异导致称量时吸潮或体积误差。
 

　　开封与分装：首次开封的标准品需按最小使用量进行分装，避免反复冻融(尤其是生物类标准品)；分装时使用无菌、无酶的一次性离心管，做好标签标注(名称、浓度、分装日期、有效期)。
 

　　纯度确认：使用前核对标准品证书，确认其纯度、水分、杂质含量等指标，若为含结晶水的标准品，需在计算配制浓度时计入结晶水比例，避免浓度偏差。
 

　　器具的准备与校准
 

　　量具选择：根据配制体积选择合适精度的器具，如配制 10mL 以下溶液用移液枪 / 移液管(A 级精度)，100mL 以上用容量瓶；严禁用普通量筒进行精准配制。
 

　　器具清洁：所有接触标准品的器具需用超纯水清洗 3 遍以上，有机类标准品还需用对应有机溶剂润洗，避免残留杂质污染标准品。
 

　　校准核查：定期校准移液枪、容量瓶等器具，确保其误差在允许范围内，校准记录需留存备查。
 

　　溶剂的选择与处理
 

　　匹配标准品特性：水溶性标准品优先用超纯水(电阻率≥18.2MΩ・cm)配制；脂溶性标准品需选择对应有机溶剂(如甲醇、乙腈、正己烷)，且溶剂需为色谱纯或分析纯以上级别。
 

　　溶剂预处理：易挥发溶剂需在通风橱内操作，避免溶剂挥发影响浓度；含缓冲体系的溶剂需提前调节 pH 值至要求范围，且现配现用，防止缓冲能力失效。
 

　　二、称量与定容的操作注意事项
 

　　称量环节
 

　　天平选择：根据标准品的称量范围选对应精度天平，如毫克级标准品用十万分之一分析天平，克级标准品可用万分之一天平。
 

　　防吸潮与防挥发：易吸潮的标准品需在干燥器内快速称量；易挥发的液体标准品需用封口膜密封称量瓶，减少挥发损失。
 

　　平行称量：建议进行 2 次平行称量，若两次结果偏差超过 0.5%，需重新称量，确保称量数据准确。
 

　　定容环节
 

　　溶解完全：将称量好的标准品转移至容量瓶后，加入少量溶剂充分振摇或超声，确保标准品完全溶解，无肉眼可见颗粒；生物类标准品(如蛋白、核酸)需轻柔颠倒混匀，避免剧烈震荡导致活性失效。
 

　　定容精准：待溶液温度与室温一致后，用溶剂缓慢加至容量瓶刻度线，接近刻度时用胶头滴管逐滴添加，确保凹液面与刻度线平齐；定容后颠倒容量瓶10~15 次，使溶液充分混匀。
 

　　三、稀释过程的核心注意事项
 

　　稀释梯度的选择
 

　　高浓度标准储备液需采用逐级稀释法，避免直接稀释导致浓度误差，例如将 1000μg/mL 储备液先稀释至 100μg/mL 中间液，再稀释至 10μg/mL 工作液。
 

　　稀释倍数不宜过大，单次稀释倍数建议不超过 100 倍，若需极低浓度标准液，可分多次小倍数稀释。
 

　　稀释操作细节
 

　　移取储备液时，移液枪枪头需润洗2~3 次，减少挂壁损失；转移后需用溶剂冲洗移液管内壁，确保全部转移至稀释容器。
 

　　稀释过程中需边加溶剂边轻柔混匀，尤其是粘稠或易分层的标准品溶液，避免局部浓度不均。
 

　　稀释后稳定性核查
 

　　部分标准品(如维生素、农药残留标准品)的工作液稳定性较差，需现配现用；若需短期保存，需在证书规定条件下储存，并在使用前核查其外观(无浑浊、沉淀、变色)。
 

　　四、配制后的储存与记录注意事项
 

　　储存条件
 

　　按标准品证书要求储存，如生物类标准品需 - 20℃冷冻保存，有机类标准品可冷藏避光保存；储存容器需密封，避免与橡胶塞等材质接触导致吸附。
 

　　工作液建议分装为单次使用量，避免反复解冻或开启导致污染和浓度变化。
 

　　记录留存
 

　　做好配制记录，内容包括标准品名称、批号、证书编号、称量质量 / 体积、溶剂种类、配制浓度、稀释梯度、配制日期、操作人员等，确保数据可追溯。